Химия - Бумажная хроматография - Обнаружение

28 февраля 2011


Оглавление:
1. Бумажная хроматография
2. Носитель
3. Методика
4. Обнаружение

Пятна на хроматограммах могут быть обнаружены по цвету, флуоресценции, с помощью химических реакций, для чего бумагу опрыскивают или погружают в различные реагенты, или же по радиоактивности. Идентификацию проводят обычно путём сравнения с образцами с известными величинами Rf или после элюирования, которое сводится к вырезанию зоны, содержащей пятно, и последующему промыванию её соответствующим растворителем.

Пептидные карты

Важной проблемой в молекулярной биологии является идентификация выделенного белка или установление изменения аминокислотного состава в мутантном белке. Для решения этих задач была разработана техника «отпечатков пальцев». Если белок подвергнуть расщеплению в стандартных условиях с использованием различных протеиназ, в качестве продуктов образуются небольшие пептиды. Число и типы получающихся пептидов зависят от строения данного белка и вида использованной протеиназы. Пептиды можно затем разделить при помощи двумерной хроматографии на бумаге, получая при этом распределение пятен, которое практически никогда не совпадает для различных белков. Такая пептидная карта и называется «отпечатками пальцев». Этот метод находит несколько важных приложений в молекулярной биологии, среди которых можно отметить следующие: доказательство того, что один белок является продуктом расщепления другого; идентификация аминокислот, вводимых с помощью различных супрессорных тРНК; идентификация замен оснований в результате частичного мутагенеза.

Просмотров: 5064

<<< Высокоэффективная жидкостная хроматография