Химия - Биуретовый метод
01 марта 2011один из колориметрических методов количественного определения белков в растворе. Разработан в 1949 году Горналлом, Бардавиллом и Дэвидом, ныне мало используется в биохимической лабораторной практике из-за низкой чувствительности.
Принцип
Основан на образовании биуретового комплекса пептидных связей белков с двухвалентными ионами меди. В методе используют т. н. биуретовый реактив, состоящий из KOH, CuSO4 и цитрата натрия. В образовавшемся комплексе медь связана с 4 азотами координационными связями, а с 2 кислородами электростатическими. Полноценный комплекс образуется лишь с пептидами, состоящими более чем из 4 остатков. Оптическую плотность раствора определяют при 540—560 нм.
К достоинствам метода стоит отнести его низкую чувствительность к посторонним веществам, невысокую погрешность.
Чувствительность метода 2-10 мг/мл.
Просмотров: 1782
|