Химия - Гибридизация ДНК

01 марта 2011


Оглавление:
1. Гибридизация ДНК
2. Саузерн-блоттинг и нозерн-блоттинг

соединение in vitro комплементарных одноцепочечных нуклеиновых кислот в одну молекулу. При полной комплементарности объединение происходит легко и быстро, а в случае частичной некомплементарности слияние цепочек замедляется, что позволяет оценить степень комплементарности. Возможна гибридизация ДНК-ДНК и ДНК-РНК.

Протокол эксперимента

1. Двуцепочечную ДНК разогревают в соответствующем буфере.
2. Из-за изменения внешних условий, водородные связи между комплементарными азотистыми основаниями становятся термодинамически невыгодными и цепочки расходятся.
3. Препарат денатурированных ДНК затем смешивается с другой денатурированной ДНК.
4. Препараты далее медленно охлаждаются, при этом одноцепочечные ДНК отжигаются друг на друга, при этом образуется «гибридная» молекула ДНК.

Анализ скорости отжига одноцепочечных ДНК позволяет оценивать сходства и различия в последовательностях ДНК между видами или особями одного вида.

Просмотров: 2305

<<< Дансил хлорид