Химия - Репортёрный ген
01 марта 2011Репортёрные гены в молекулярной биологии гены, которые присоединяют к регуляторным последовательностям других генов для исследования проявлений генов в культурах клеток. Некоторые репортёрные гены используются исследователями, так как их экспрессия придаёт организму чётко выраженные легко измеряемые характеристики, некоторые, так как они являются селективными маркерами. Репортёрные гены используют для того, чтобы определить уровень экспрессии гена в клетке или в популяции. Часто в генно-инженерные конструкции встраивают в качестве репортёра ген LacZ.
Применение
Интересующий исследователя ген и ген-репортёр обычно встраивают в одну генетическую конструкцию, а затем вводят её в клетку или организм. В случае клеток бактерий и эукариот для введения обычно используют кольцевые молекулы ДНК плазмиды. Важно, чтобы ген-репортёр в норме не экспрессировался в клетке, тогда экспрессия гена-репортёра будет свидетельствовать о том, что интересующий ген попал в клетку.
Широкое применение находят репортёрные гены, кодирующие флюоресцентные и люминесцентные белки:
- ген медузы, кодирующий зеленый флуоресцентный белок, экспрессия которого проявляется в появлении зелёного свечения при освещении синим светом;
- ген фермента люциферазы, которая катализирует реакцию с люциферином и вызывает свечение;
- ген красного флуоресцентного белка dsRed;
- бактериальный ген LacZ, кодирующий фермент бета-галактазидазу, экспрессия которого приводит к появлению синей окраски на среде, содержащей субстрат X-gal;
- ген хлорамфеникол-ацетилтрансферазы обуславливает устойчивость к антибиотику хлорамфениколу.
Просмотров: 1961
|