Химия - Высокоэффективная жидкостная хроматография - Нормально-фазовая ВЭЖХ

28 февраля 2011


Оглавление:
1. Высокоэффективная жидкостная хроматография
2. Нормально-фазовая ВЭЖХ
3. Прививки неподвижной фазы

Неподвижная фаза более полярна, чем подвижная, поэтому в составе элюента преобладает неполярный растворитель:

• Гексан:изопропанол = 95:5
• Хлороформ:метанол = 95:5
• Хлороформ:метанол = 80:20

Обращённо-фазовая ВЭЖХ

Неподвижная фаза менее полярна, чем подвижная, поэтому в составе элюента почти всегда присутствует вода. В этом случае всегда можно обеспечить полное растворение БАС в подвижной фазе, почти всегда возможно использовать УФ-детекцию, почти все подвижные фазы взаимно смешиваются, можно использовать градиентное элюирование, можно быстро переуравновесить колонну, колонну можно регенерировать.

Матрицы для ВЭЖХ

В качестве матриц в ВЭЖХ использяются неорганические соединения, такие как оксид кремния или оксид алюминия, либо органические полимеры, такие как полистирол или полиметакрилат. Силикагель, конечно, в настоящее время общепризнан.

Основные характеристики матрицы:

• Размер частиц;
• Размер внутренних пор.

Получение силикагеля для ВЭЖХ:

1. Формование микросфер поликремневой кислоты;
2. Сушка частиц силикагеля;
3. Воздушное сепарирование.

Частицы сорбента:

• Регулярные: выше устойчивость к давлению, выше стоимость;
• Несферические: ниже устойчивость к давлению.

Размер пор в ВЭЖХ — один из наиболее важных параметров. Чем меньше размер пор, тем хуже их проницаемость для молекул элюируемых веществ. А следовательно, тем хуже сорбционная емкость сорбентов. Чем крупнее поры, тем, во-первых, меньше механическая устойчивость частиц сорбента, а, во-вторых, тем меньше сорбционная поверхность, следовательно, хуже эффективность.

Просмотров: 3901

<<< Бумажная хроматография